关于不锈钢发酵罐中有害微生物的控制问题

常用的无菌技术和方法主要有以下几种，可根据灭菌的对象和要求选用不同方法。 

一、干热灭菌法 

1.火焰灭菌法 

火焰灭菌法即利用火焰直接将微生物烧死，主要用于金属接种工具、试管口、锥形瓶口、接种行色匆匆 液管和滴管外部及无用的污染物（如称量化学诱变剂的称量纸）等的灭菌。对金属小镊子、小刀、玻璃涂棒、载玻片、盖玻片灭菌时，应先将其浸泡在75%酒精溶液中，使用时从酒精溶液中取出来，迅速通过火焰，瞬间灼烧灭菌。该方法简单，灭菌彻底，但适用范围有限。 

2.干热空气灭菌法 

干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂等方面的灭菌，不适合橡胶，塑料及大部分药品的灭菌。 在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强，必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此，干热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果，通常采用以下几种方法：135~140℃灭菌3~5h；160~170℃灭菌2~4h；180~200℃灭菌0.5~1h。 

二、湿热灭菌法 湿热灭菌法是指用饱和水蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，具有很强的穿透能力，而且在冷凝时会放出大量热能，使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，造成微生物死亡。从灭菌的效果来看，干热灭菌不如湿热灭菌有效，干热灭菌温度每升高10℃时，灭菌速率常数仅增加2~3倍；而湿热灭菌对耐热芽孢的灭菌速率常数增加的倍数可达到8~10倍，对营养细胞则速率常数增加得更高（通常湿热灭菌条件为121℃，维持30min）。所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高且经济实惠，是生产上常用的灭菌方法，已被广泛用于工业生产中大量培养基、设备、管路及阀门的灭菌。影响湿热灭菌方法的主要因素有：微生物的各类与数量、蒸汽的性质和灭菌时间等。湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法和间歇蒸汽灭菌法。 

1.煮沸灭菌法 煮沸灭菌法即将水煮沸至100℃，保持5~10min可杀死细菌繁殖体，保持1~3h可杀死芽孢。在水中加入1~2%的碳酸氢钠时沸点可达105℃，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀剪及载玻片等。 

2.巴氏消毒法 巴氏消毒法是指温度比较低的嫌麻烦处理方法，一般在低于水沸点温度下进行。杀菌条件为61~63℃，30min，或72~75℃，10~15min。加热时应注意物料表面温度较内部温度低4~5℃；此外，当表面产生气泡时，泡沫部分难以达到杀菌要求。这种杀菌方法，由于所需时间长，生产过程不连续，长时间受热容易使某些热敏成分变化，杀菌也不够理想。 

 

 

 

3.流通蒸汽灭菌法 流通蒸汽灭菌法，利用直接加热的流通水蒸汽杀菌微生物的方法。本法适用于瓷制、金属制、橡胶制、纤维制的物品、水、培养基和试验液等的灭菌。用干热灭菌法或高压蒸汽灭菌法，物品有变质危险，所以灭菌的时间要控制适当。